一、試劑盒簡介

帶gDNA Remover的新一代逆轉錄試劑盒為包含去除基因組DNA的高效DNase的新一代快速逆轉錄試劑盒，與上一代產品相比具有更高的逆轉錄效率。試劑盒中主要包含3管成分:aDNA Remover中主要包括濃縮的DNase及Buffer;4xEZscript RT Mixl中主要包含了逆轉錄所需的所有成分(逆轉錄酶、buffer、RNaseInhibitor、dNTPs、Oligo dT18Random Hexamer等)。

帶gDNA Remover的新一代逆轉錄試劑盒采用的DNase及Buffer反應系統(tǒng)經(jīng)過特殊的優(yōu)化，僅需室溫(25℃)反應5分鐘，就能降解95%以上的基因組 DNA，極大的降低了可能殘留的基因組對結果的干擾。

本試劑盒采用的新型M-MLV突變體逆轉錄酶具有很強的抗干擾能力及擴增能力，擴增效率尤佳，同時采用了新優(yōu)化的反應體系，進一步提高了逆轉錄效率。使用本試劑盒逆轉錄15分鐘得到的擴增產物量可以達到AMV逆轉錄酶大約1h的產物量(Ct值相同)。后續(xù)逆轉錄產物建議用于PCR、qPCR，不建議用于基因克隆。

二、產品組分

Components                        EZB-RT2GQ(100Rxnsx20 ul) 

gDNA Remover*1                               550 μl 

4xEZscript RT Mix11*2                       220 μl 

Nuclease free ddH2                             1ml 

*1:包括DNase和Buffer:

*2:包括逆轉錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPMixture、Oligo(dT)18PrimerRandom Hexamer Primer等組分。

三、保存條件

本試劑盒建議置于-20℃保存。

四、試劑盒特點

1、本試劑盒為預先混好的4xEZscripRTMixl，只需加入模板RNA和水溫勻后便可以開始反應;使用了新一代逆轉錄酶，具有更強的酶活性和更高的靈敏度。

2、含有去除基因組DNA的aDNARemover，只需室溫5分鐘即可去除基因組DNA。

3、只需42℃ 15分鐘即可高效合成熒光定量PCR所需的高質量cDNA模板。

4、反轉錄引物使用了Oliao(dT)18和Random Hexamer這兩種引物的混合物，極大提高了反轉錄的效率。

5、反轉錄反應可選擇多種儀器如水浴鍋，金屬浴，不局限干PCR儀。

五、注意事項

1當同時需要進行數(shù)次反應時，應先配制各種試劑的混合液，然后再分裝到每個反應管中。這樣可使所取的試劑體積更準確，減少試劑損失，避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或實驗之間產生的誤差。

2aDNA Remover和4xEZscript RTMixl在使用前需上下顛倒混勻，短暫離心后使用。由干酶保存液中含有50%的日油，粘度高，分取時應慢慢吸取。同時，要使用精確、量程適合的移液槍，并且不要使Tip插入液面過深，否則會因Tip壁粘著造成損失，而使酶量不足。

3、分裝試劑時務必使用新的槍頭(Tip)，以防止樣品間污染